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做ELISA標準曲線需要注意事項如下
發布時間:2022-10-19   點擊次數:159次
  由于以漸近線開始和結束,曲線范圍之外的數據可能會產生不準確的結果。更進一步說,試著在S中間標準曲線的線性范圍內工作。一般來說,未知計算在曲線的線性范圍內更準確??梢韵♂尦鰳藴是€范圍的樣本,根據標準曲線計算濃度,然后根據初始稀釋值乘以相應倍數。做ELISA標準曲線需要注意事項如下:
  1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。
  2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。
  3、最好采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
  4、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
  5、標準曲線的樣品數一般為7個點,但至少要保證有5個點。
  6、做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。
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