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小鼠ELisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
發布時間:2022-10-27   點擊次數:139次
    小鼠ELisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  小鼠ELisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
  1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
  2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
  3.細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
  5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  小鼠ELisa試劑盒操作注意事項
  1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶溶解后再使用。
  2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
  3.標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白;預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
  4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
  5.所有液體組分使用前充分搖勻。
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